T4 DNA聚合酶 | 9012-90-2

英文名稱 ： T4 DNA Polymerase

C A S ： 9012-90-2

保 存 ： -20℃

分子量 ： 104kDa，單體

級(jí) 別 ： BR

來(lái) 源 ： 含有T4噬菌體克隆基因43的大腸桿菌

濃 度 ： 5～10u/ul

活性定義 ： 是指在37℃、30分鐘內(nèi)將10nmol脫氧核糖核苷酸摻入多聚核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量

酶活性分析混合物 ： 67mM Tris-HCL(PH8.8), 1mM DTT, 6.7mM MgCL2, 16.7mM (NH4)2SO4, 0.2mg/ml BSA, 0.033mM各種dNTP,dGTP, 0.4MBq/ML(3H).-dTTP和0.2mM熱變性和核酸酶處理的牛胸腺DNA

保存緩沖液組分 ： 20mM 磷酸鉀(PH7.5), 200mM KC1, 20mM DTT和50%(v/v)甘油

5×反應(yīng)緩沖液 ： 335mM Tris-HCL(PH8.8，25℃), 33mM MgCL2, 5mM DTT, 84mM (NH4)2SO4

抑制劑 ： 金屬螯合劑，核苷酸類似物2(p-n-butylanilino)-dATP、N2-(p-n-burylanilino)-dGTP、SH-封閉混合物

失 活 ： 75℃加熱10分鐘

質(zhì)量控制 ： 測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切脫氧核糖核酸酶污染

性 狀 ： 懸浮液。重組酶，在模板及引物存在的條件下，T4 DNA聚合酶催化沿5'→3'方向DNA的合成。本酶還具有3'→5'外切核酸酶的活性，該活性比DNA聚合酶I強(qiáng)。T4 DNA聚合酶不像大腸桿菌DNA 聚合酶 I，不具有5'→3' 外切核酸酶的活性。

用 途 ： 生化研究。3'突出末端平滑化；5'突出末端補(bǔ)平；單鏈刪除后亞克隆；基因定位突變中的第二條鏈的合成；通過置換合成法（replacement synthesis）對(duì)DNA探針進(jìn)行標(biāo)記。