Hotstart Taq酶

其他中文名稱(chēng) ： Hotstart Taq DNA聚合酶

英文名稱(chēng) ： Hotstart Taq DNA Polymerase

分子量 ： 94kDa，單體

保 存 ： -20℃，保質(zhì)期1年

級(jí) 別 ： BR

純 度 ： ≥99%

濃 度 ： 5u/ul

活性定義 ： 在74℃、30分鐘內(nèi)，使10nmol脫氧核糖核酸合成滲入多聚核苷酸（吸附在DE-81上）所需的酶量

酶活性分析混合物 ： 25mM TAPS(PH9.3,25℃), 50mM KC1, 2mM MgCL2, 0.2mM各種dATP,dGTP,dTTP, 0.1mM dCTP, 0.75mM活化的鮭魚(yú)精DNA和0.4MBq/ML(3H).-dTTP

保存緩沖液組分 ： 20mM Tris-HCL(PH9.0), 1mM DTT, 0.1mM EDTA,100mM KC1, 0.5%(V/V) Tween 20，0.5%(v/v) Nonidet P40和50%(v/v)甘油

10×Hot start PCR Buffer ： 200mM Tris-HCL(PH8.3,25℃), 200mM KC1, 50mM (NH4)2SO4

抑制劑 ： 陰離子去污劑（脫氧膽酸、肌氨酰和SDS的濃度分別高于0.06、0.02和0.01%時(shí)）

失 活 ： 酚/氯仿抽提

質(zhì)量控制 ： 相關(guān)測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染

功能啟動(dòng) ： 熱啟動(dòng)PCR

性狀 ： 液體。設(shè)計(jì)用于增強(qiáng)DNA擴(kuò)增的特異性、敏感性和產(chǎn)量。使用該酶可在室溫配制反應(yīng)體系，使用方便。它是一種化學(xué)修飾的重組Taq DNA Polymerase，蛋白分子氨基酸殘基上增加了熱不穩(wěn)定的封閉基團(tuán)。該酶在室溫下沒(méi)有活性，避免形成引物二聚體和非特異性延伸，從而增加DNA擴(kuò)增的特異性。95℃加熱4分鐘可恢復(fù)活性。活化的酶具有與Taq DNA Polymerase相同的功能：催化5——3方向合成DNA，無(wú)可檢測(cè)的3——5校正外切酶活性，具有較低的5——3外切酶活性。該酶還具有脫氧核糖核酸酶轉(zhuǎn)移活性，在PCR產(chǎn)物的3-端多加11個(gè)腺嘌呤，活化前檢測(cè)不到這些活性。

用 途 ： 生化研究。高產(chǎn)量擴(kuò)增復(fù)雜模板；PCR特異性高-降低錯(cuò)配效應(yīng)和減少引物二聚體的生成；增強(qiáng)的PCR敏感性；使用方便，室溫配制PCR反應(yīng)體系；擴(kuò)增產(chǎn)物具有3-dA突出末端；熱啟動(dòng)PCR；高產(chǎn)量擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)3kb片段；RT-PCR；特異性擴(kuò)增復(fù)雜cDNA和基因組模板；擴(kuò)增低拷貝DNA模板；實(shí)時(shí)PCR；多重PCR；制備TA克隆用PCR產(chǎn)物